客戶背景

　　在水產(chǎn)養(yǎng)殖領(lǐng)域，魚類疾病防控是全球性難題，疫苗和佐劑的研究備受關(guān)注。近期發(fā)表在《Fish and Shellfish Immunology》的一篇研究（DOI: 10.1016/j.fsi.2025.110415）展示了草魚補(bǔ)體C5a C端肽（C5a-CP）作為疫苗佐劑的卓越潛力。這項(xiàng)研究由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)和珠江水產(chǎn)研究所聯(lián)合完成，揭示了C5a-CP在增強(qiáng)草魚IgM?B細(xì)胞吞噬活性和提高疫苗免疫效果方面的關(guān)鍵作用，為魚類疫苗佐劑的開(kāi)發(fā)提供了重要理論基礎(chǔ)。

客戶需求

　　研究中需要表達(dá)草魚IgM重鏈恒定區(qū)（IgM-CH）并制備抗C5aR的多克隆抗體（pAbs），以驗(yàn)證C5a-CP的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制。

技術(shù)難點(diǎn)

　　1. 蛋白表達(dá)與純化：草魚IgM-CH等魚類蛋白因其特殊結(jié)構(gòu)和序列特性，在異源表達(dá)系統(tǒng)中（如大腸桿菌）易發(fā)生錯(cuò)誤折疊或低表達(dá)量，需優(yōu)化表達(dá)條件和純化流程。

　　2. 抗體特異性：抗C5aR抗體的制備需針對(duì)特定抗原表位（如C5aR N端肽）設(shè)計(jì)，確保抗體能特異性結(jié)合目標(biāo)蛋白，同時(shí)避免非特異性信號(hào)干擾。

　　3. 功能驗(yàn)證：重組蛋白和抗體需在復(fù)雜的生物學(xué)實(shí)驗(yàn)（如吞噬實(shí)驗(yàn)、Ca²?動(dòng)員檢測(cè)）中保持生物活性，需嚴(yán)格的質(zhì)量控制。

技術(shù)服務(wù)方案

　　我們提供一站式蛋白表達(dá)與抗體定制服務(wù)，助力草魚C5a-CP研究：

　　1. 重組IgM-CH表達(dá)與純化：

　?。?）腸桿菌系統(tǒng)中表達(dá)GST標(biāo)簽IgM-CH（GenBank: DQ417927.1），通過(guò)IPTG誘導(dǎo)及梯度尿素透析復(fù)性，確保蛋白純度>95%及ELISA檢測(cè)活性。

　　（2）采用親和層析結(jié)合BCA法定量，保證蛋白符合標(biāo)準(zhǔn)曲線構(gòu)建需求（0.015625-0.25 μmol/L）。

　　2. 抗C5aR pAbs定制與驗(yàn)證：

　?。?）針對(duì)C5aR N端肽（DYGPFDFSNESYSC）設(shè)計(jì)抗原，制備兔源pAbs，通過(guò)免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證特異性，確保C5aR?細(xì)胞準(zhǔn)確標(biāo)記。

　?。?）交付周期4-6周，滿足項(xiàng)目進(jìn)度。

　　3. 功能驗(yàn)證支持：

　　（1）提供ELISA檢測(cè)IgM-CH活性，流式細(xì)胞術(shù)驗(yàn)證抗C5aR pAbs在IgM? B細(xì)胞中的特異性。

　?。?）支持Ca²?動(dòng)員（Fluo4-AM）和吞噬實(shí)驗(yàn)（熒光微珠），確保C5a-CP功能驗(yàn)證可靠。

　　我們的蛋白表達(dá)和抗體定制技術(shù)可確保IgM-CH蛋白和抗C5aR抗體的穩(wěn)定供應(yīng)，支持其在疫苗佐劑開(kāi)發(fā)中的關(guān)鍵驗(yàn)證。研究結(jié)果表明，C5a-CP顯著提高草魚對(duì)Aeromonas hydrophila和GCRV-II的免疫保護(hù)率（RPS達(dá)96.03%），為魚類疫苗佐劑開(kāi)發(fā)開(kāi)辟新路徑。

　　聯(lián)系我們獲取定制化的蛋白表達(dá)與抗體服務(wù)方案！訪問(wèn)www.atagenix.com，我們的專業(yè)團(tuán)隊(duì)將為您提供從抗原設(shè)計(jì)到功能驗(yàn)證的全流程支持，助力您的科研成果登上國(guó)際舞臺(tái)！